藏獒的犬瘟热讲述

犬瘟热是由副粘病毒科麻疹病毒属犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）引起的犬科、鼬科、浣熊科等多种动物的一种急性、热性、高

度接触性传染病[1]。该病在临床上以双相热性、卡他性鼻炎及随后引起的支气管炎、卡他性肺炎、严重的胃肠炎和神经症状为主要特征，少数

病犬可见下腹部脓性皮疹及足垫角化过度。发病率几乎达100%，死亡率达30~80%不等，素有“毁灭性传染病”之称[2]。由于本病经常引起混合

感染及继发感染，给经济动物养殖业造成巨大的经济损失。要减少犬瘟热病造成的经济损失，尽早采取防治措施，因此对该病的诊断尤为重要

。
    流行特点 在自然条件下可感染多种犬科野生食肉兽，如小熊猫、貉、貂、黄鼠狼，以及豺、狼、獾等。本病一年四季都可发生，冬春季多

发。6月龄以内的幼犬特别易感染，症状典型，死亡率极高。世界各地都有流行

    临床症状 体温呈双相热型。病初以呼吸道炎症为主，表现为流涕、打喷嚏、咳嗽，常为干咳，严重时鼻镜龟裂，呼出恶臭气体，流脓性鼻

液，堵塞鼻孔，张口呼吸呈腹式。肺部听诊，支气管音粗厉，闻干性罗音或湿性罗音或捻发音。可视粘膜发绀，眼睑周围有散性出血点，眼睑

干燥，呈脓性眼结膜炎，角膜溃疡，甚至穿孔。若以消化道炎症为主时，主要表现为食欲不振或废绝，呕吐，腹泻，排出带有黏液的稀便，有

时带有血液。在后期出现非化脓性脑炎并导致神经症状，流涎，空嚼，有时全身肌肉振颤，转圈，共济失调，口吐白沫，牙关紧闭，最后抽搐

而死.

    临床类症鉴别 犬瘟热在临床上容易与感冒、呼吸道疾病、胃肠炎、犬细小病毒性肠炎、传染性肝炎等相混淆，根据其临床特征与犬瘟热进

行初步鉴别诊断。单纯性胃肠炎时，无双相热型、无鼻、眼分泌物等。传染性肝炎时，有黄疸等。犬细小病毒性肠炎呕吐剧烈、频繁、饮水后

立即发生呕吐，渴欲强烈，排出的番茄汁样血便次数多、数量大。感冒时体温升高，无双相热型，鼻流清涕，无流泪现象。而犬瘟热双相热型

，眼、鼻有分泌物，严重时有脓性分泌物；病犬饮水后较少发生呕吐，初便秘，后腹泻，粪便稀薄、恶臭，有时混有气泡和血液；鼻、足垫过

度角化；末期常出现腹痛、肌肉振颤等神经症状，甚至惊厥直至死亡.

    包涵体检查 包涵体主要存在于膀胱、胆管、胆囊、肾盂上皮细胞内。取清洁载玻片，滴加生理盐水1滴，用小刀在膀胱黏膜上刮取上皮细

胞，与生理盐水混合研匀，制成涂片，置空气中自然干燥后，用甲醇固定，苏木精-伊红染色后镜检。细胞核染成蓝紫色，细胞浆呈淡玫瑰色，

包涵体被染成红色。包涵体大多在胞浆内，1个细胞内可能含有1~10个多形性包涵体，但一般呈现圆形或椭圆形。程世鹏等（1999）分别对用强

毒攻毒、注射犬瘟热疫苗和正常狐貉进行检查，结果用强毒攻毒的狐貉发现了膀胱黏膜涂片中有包涵体的存在，而注射犬瘟热疫苗组和正常对

照组则无包涵体的存在，对于临床发病动物检查同样可检查出包涵体的存在.

    Dot-ELISA法诊断 金鑫等（2000）用建立的三抗体夹心法Dot-ELISA检测犬瘟热病毒（CDV）抗原，其抗原最低检出量为1.15ug/ml

(0.57625ng/点)，经与常规ELISA对104份自然感染犬的血液白细胞样本，60份眼结膜分泌物样本，73份脾、肝、淋巴结等脏器样本.

    进行检测，检测的阳性率分别为92.31%、66.67%、83.56%和 90.72%、63.29%、81.86%.

    两种方法检出的总阳性率分别为83.54% (198/237)和80.17% (190/237)，总阳性符合率为95.96%，表明两者呈高度正相关 (r=0.92,

P<0.01)。经电子显微镜观察验证比较，三抗体夹心法Dot-ELISA检测的可信度为 94.74%.

    免疫组化法诊断 免疫组化技术是在抗原抗体特异反应存在的前提下，借助免疫化学的手段，检测抗原（或抗体）在组织细胞内存在部位的

一门新技术，目前已广泛应用于人及动物传染病的病原鉴定和快速诊断，极大地提高了传染病的诊断和防治水平.

    Gathumbi等 (1993)研究证实，从脑、脊髓、肺、肠、膀胱、脾和淋巴结中均可检出 CDV抗原，其中中枢神经系统和肺是诊断的最佳组织，

脱髓鞘性脑炎和肺炎是犬瘟热的主要病变[7]。Miry等 (1983)采用过氧化物酶法（PAP）技术检查患犬瘟热性肺炎的病犬组织，认为有病变的脏

器组织均可检出CDV抗原，且敏感性明显高于包涵体检查[8]。Mitchell等 (1991)采用PAP和单抗技术证实了实验性感染CDV脱髓鞘性脑炎病犬的

脑组织中，不论是脱髓鞘部位还是未见明显病变的白髓的神经胶质细胞中均可见到病毒抗原。阳性细胞包括星状细胞、神经元细胞、室管膜细

胞、脉络丛细胞、脑膜细胞和血管周围的炎性细胞.

    Kristensen等 (1978)采用免疫荧光（IF）技术研究了患犬瘟热性脑炎病犬的CDV分布情况，结果从全部病犬的脑组织中均检出CDV抗原，在

灰质和白质中均可见到病变。在灰质中，抗原主要分布于神经元细胞中，包涵体呈成堆的大的颗粒样或细小颗粒状或粉尘样聚集在胞浆中；在

白质中主要存在于星状细胞中[10]。Liu等(1957)采用IF技术证实，在人工感染CDV后3~4天，即可从循环血单核细胞中检出CDV抗原，病犬第一

次发热时最具传染性.

犬瘟热病毒的分离和鉴定

    病料的采集 采取何种病料，应根据疾病的类型和病情的发展情况而定。在体温开始上升的病毒血症早期，淋巴组织的感染最为严重，因此

最好从淋巴细胞和淋巴组织分离病毒。对于急性病兽或急性死亡动物，病毒分布于全身各器官，故应从脏器中分离病毒。在慢性病例或疾病的

中后期多从肾脏或脑组织分离病毒.

    病毒分离 犬瘟热病毒能够适应鸡胚和多种组织细胞培养物，但并非所有毒株都能生长良好。犬瘟热病毒通过绒毛尿囊膜接种9~11日龄鸡胚

，经3~10代后，于接种后5~7天绒毛尿囊膜增厚，有的可引起豆斑。有报道认为，分离犬瘟热病毒最好的方法是用犬和貂的巨噬细胞培养物，接

种2~3天后出现圆形多核巨细胞。巨细胞容易脱落，而且并非所有的细胞都形成巨细胞，故应多次仔细观察.

    病毒的鉴定 通过电子显微镜检查、酶标SPA染色和琼脂扩散试验等方法进行病毒鉴定。电镜下观察可见犬瘟热病毒粒子呈现多形性，多数

为球形，病毒粒子的直径为110~550nm之间。核衣壳呈螺旋状，总长度为1000nm，螺旋直径15~19nm，螺旋中心5nm的孔，螺距5~6nm，核衣壳由

囊膜包裹，其内部为M，厚约5nm，表面为H和F两个糖蛋白组成的纤突，纤突长度为9nm.
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    遇秀玲等（1998）应用酶标SPA（葡萄球菌A蛋白）染色法对接种CDV的Vero细胞进行染色后发现，有相应CDV抗原部位，同样滴加CDV阳性血

清的对照细胞片，未见相应反应。CDV MD- 77株感染后 3、6、9、12 h，胞浆可见细小阳性颗粒（呈淡黄色至棕褐色着染）；1天后阳性反应明

显增强，多见于胞浆，胞浆亦可见大空泡；2后天坏死细胞呈强阳性反应，细胞间拉网；3~4天后合胞体细胞呈强阳性反应，坏死细胞呈棕褐色

至黑褐色；5天后阳性反应主要见于新生细胞胞浆；6天后合胞体细胞呈大圆形，阳性反应主要见于胞浆；7天后整个合胞体细胞呈一棕褐色大团

块；8天后大部分细胞脱落，残留细胞呈强阳性反应.